[1]李雪莲,于洪娟,朱小琼,等.基于TaqMan MGB探针的大豆北方茎溃疡病菌快速检测[J].大豆科学,2024,43(03):317-325.[doi:10.11861/j.issn.1000-9841.2024.03.0317]
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基于TaqMan MGB探针的大豆北方茎溃疡病菌快速检测

《大豆科学》[ISSN:1000-9841/CN:23-1227/S] 卷: 第43卷 期数: 2024年03期 页码: 317-325 栏目: 出版日期: 2024-05-20
Title:
TaqMan MGB-based Real-time Fluorescent PCR Method for The Rapid Detection of Diaporthe caulivora
作者:
李雪莲1; 2; 于洪娟1; 3; 朱小琼3; 段维军1; 2
1.宁波检验检疫科学技术研究院，浙江 宁波 315012；2.中华人民共和国宁波海关，浙江 宁波 315012；3.中国农业大学 植物保护学院，北京 100193
关键词:
大豆北方茎溃疡病菌; 实时荧光PCR; TaqMan-MGB探针; 快速检测
DOI:
10.11861/j.issn.1000-9841.2024.03.0317
摘要:
为准确快速检测检疫性真菌大豆北方茎溃疡病菌，根据大豆北方茎溃疡病菌及其近似种的模式分离物ITS序列差异，设计并合成1对特异性引物和1条MGB探针，建立大豆北方茎溃疡病菌的实时荧光PCR检测方法。特异性试验结果表明：该检测方法能特异性检测大豆北方茎溃疡病菌。灵敏度试验结果表明：最低检测限量为10 μL反应体系中总DNA含量1.0 pg；实时荧光PCR优化反应条件为引物终浓度0.5 μmol·L-1，探针终浓度0.6 μmol·L-1。实际样品检测结果表明：该方法可用于疑似受大豆北方茎溃疡病菌侵染的进境大豆样品的检测与初筛。此方法准确、快速、灵敏，整个反应过程约1 h，检测过程完全闭管，无需PCR后续处理，可作为大豆北方茎溃疡病菌检测防控方法。
更新日期/Last Update: 1900-01-01