[1]张晓雷,檀根甲,魏梅生,等.GICA-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒的新方法[J].大豆科学,2008,27(06):1019-1023.[doi:10.11861/j.issn.1000-9841.2008.06.1019]
　ZHANG Xiao-lei,TAN Gen-jia,WEI Mei-sheng,et al.A New Method for Detecting Bean Pod Mottle Virus by GICA-RT-PCR[J].Soybean Science,2008,27(06):1019-1023.[doi:10.11861/j.issn.1000-9841.2008.06.1019]
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GICA-RT-PCR检测菜豆荚斑驳病毒的新方法

《大豆科学》[ISSN:1000-9841/CN:23-1227/S] 卷: 第27卷 期数: 2008年06期 页码: 1019-1023 栏目: 出版日期: 2008-12-25
Title:
A New Method for Detecting Bean Pod Mottle Virus by GICA-RT-PCR
文章编号:
1000-9841(2008)06-1019-05
作者:
张晓雷1; 檀根甲1; 魏梅生2; 张永江2; 李桂芬2
1安徽农业大学植物保护学院，安徽 合肥 230063；
2 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所，北京 100029
Author(s):
ZHANG Xiao-lei1; TAN Gen-jia1; WEI Mei-sheng2; ZHANG Yong-jiang2; LI Gui-fen2
GICA；Immunostrip；BPMV；GICA-RT-PCR
关键词:
胶体金免疫层析; 试纸条; 菜豆荚斑驳病毒; GICA-RT-PCR
Keywords:
GICA; Immunostrip; BPMV; GICA-RT-PCR
分类号:
S435.6
DOI:
10.11861/j.issn.1000-9841.2008.06.1019
文献标志码:
A
摘要:
菜豆荚斑驳病毒（Bean pod mottle virus，BPMV）是我国进境植物检疫性有害生物。为解决普通RT-PCR不能直接检测大豆病种子中该病毒的问题，将简便快速的胶体金免疫层析技术(GICA)和高灵敏度的普通RT-PCR检测技术有机地结合起来，建立了GICA-RT-PCR检测新方法。即先用GICA捕获病毒，将捕获的病毒直接进行RT-PCR扩增，简化了检测的步骤，提高了检测的灵敏度。结果表明：用该方法检测提纯病毒灵敏度达到0.01μg.mL-1、检测大豆病叶和病大豆种皮，灵敏度达到 10-4，分别比GICA检测提高了20倍、10倍和100倍。GICA-RT-PCR可进一步确认GICA的结果。
Abstract:
1Plant Protection School，Anhui Agricultural University，Hefei 230036,Anhui；2Institute of Animal and Plant Quarantine，Chinese Academy of Inspection and Quarantine，Beijing 100029，ChinaAbstract： Bean pod mottle virus(BPMV)is a quarantine pest for China.A high sensitive and rapid gold immunochromatography assay-RT-PCR(GICA-RT-PCR )method has been developed for the detection of BPMV- infected soybean seed.This method takes the advantage of gold immunochromatography assay(GICA)which captures the virus first on test line，then the immunocaptured virus will be used for direct RT-PCR to amplify the target nucleic acid，eliminating the need for traditional total RNA extraction methods and reducing the number of steps involved.The sensitivity of the GICA-RT-PCR for purified virus is 0.01 μg.mL-1.BPMV-infected soybean leaves and soybean seed coat diluted to 10-4can be detected by GICA-RT-PCR.GICA-RT-PCR is 20 times，10 times and 100 times more sensitive than GICA for detecting purified BPMV，BPMV-infected soybean leaves and soybean seed coat，respectively.GICA-RT-PCR is a simple and sensitive tool for confirmation of GICA results.

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相似文献/References:

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备注/Memo

基金项目：国家质量监督检验检疫总局资助项目（2006IK216）。

作者简介：张晓雷，男，（1983-），硕士研究生，从事检疫性植物病毒检测研究。E-mail:zhangxiaolei1983819@yahoo.cn。

更新日期/Last Update: 2014-10-06